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1，多聚甲醛的结构式

多聚甲醛，多见的是“三聚甲醛”见图片

多聚甲醛的结构式

2，4多聚甲醛怎么配

4%多聚甲醛配法如下：1、第一步，使用电子天平称取4克多聚甲醛固体粉末；2、第二步，将称量好的多聚甲醛固体粉末转移到烧杯中，并加入100毫升，pH7.4的0.1摩尔/升的PBS溶液，进行搅拌；3、第三步，将烧杯置于磁力搅拌器上，加热搅拌溶解（温度控制在60度以下）；4、第四步，调剂溶液的酸碱度，使其成7.4左右，转移保存，操作完成！聚甲醛(POM)，又名缩醛树脂、聚氧化亚甲基，聚缩醛，是热塑性结晶性高分子聚合物，被誉为“超钢”或者“赛钢”。1955年前后美国杜邦公司由甲醛聚合得到甲醛的均聚物。聚甲醛很易结晶，结晶度70%以上。均聚甲醛的熔融温度为180℃左右。它是继聚酰胺之后又一种综合性能优良的工程塑料，具有高的力学性能，如强度、模量、耐磨性、韧性、耐疲劳性和抗蠕变性，还具有优良的电绝缘性、耐溶剂性和可加工性，是五大通用工程塑料之一。缩醛树脂的热降解有四种机理。第一种是热或碱催化的链解聚；结果是释出甲醛，聚合物的端基割闭可减少这种倾向；第二种是氧进攻聚合物的无规则位萱也导敛解聚，采 用抗氧剂可减少这种降解机理的发生，共聚也有助于降低这种倾向。第三种机理是缩醛树脂链被酸断裂。第四种降解是当温崖超过270℃时发生热解聚，这一点很重要，它告诫操作者加工温度要保持270℃以下，以避免聚合物降解。

4多聚甲醛怎么配

3，多聚甲醛固定细胞爬片37度要多久

4度冰箱存放的时间一般不超过1个月，而且得因细胞的抗原性而异，有的细胞涂片，如病毒感染的细胞，都不宜放在4℃。建议最好放在－20℃，要存放更长时间的应放在－80℃。用时再取出，于室温自然解冻。
先清洗细胞，尽量吸尽液体，加入4%多聚甲醛，室温固定10-15min。我一直都是这么做的，你要是觉得时间短也可以20min。

多聚甲醛固定细胞爬片37度要多久

4，4多聚甲醛怎么配

4%多聚甲醛怎么配4%多聚甲醛是常用固定液，4%指的是最终的质量体积比，因此，应该是定容至1 L。如果加液1 L，40 g PFA溶入后体积稍有增加，得到的实际浓度略小于4%，但固定液的浓度要求并不是非常精确，这点浓度变化常常不会对固定效果产生影响。多聚甲醛(Paraformalclehyde)又称固体甲醛，是一类线型短链的聚氧甲撑二醇HO(CH2O)nH(式中的n=8--100)混合物，其中还含有少量水份和甲醇。多聚甲醛性状为甲醛的固体聚合物。白色无定型粉末，有辛辣气味。其配制方法如下：（1）4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）试剂：多聚甲醛　　　　　　　　　　40g0.1mol/L磷酸缓冲液　　　　　　　　至1000ml配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液（Phosphate Buffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）使粉末*溶解，通常需滴加少许1n NaOH才能使溶液清亮，zui后补足0.1mol/L的PB于1000ml，充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，是动物经灌注固定取材后，继续浸泡固定2～24h。另外，该固定剂较为温和，适于组织标本的较*保存。（2）4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢yang化钠试剂：A液：多聚甲醛　　　　40g蒸馏水　　　　　　　　　　400mlB液：Na2HPO4·2H2O　　　　16.88g蒸馏水　　　　　　　　　　300mlC液：NaOH　　　　　　　　　3.86g蒸馏水　　　　　　　　　　200m配制方法：A液在500ml的三角烧瓶中配制（方法同前），至多聚甲醛*溶解后冷却待用。注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，以1n NaOH或1N HCl 将pH调至7.2～7.4，zui后，补充蒸馏水至1000ml充分混合，4℃冰箱保存备用。该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时，加入少量新鲜配制的戊二醛，使其终浓度为0.5%～1%。该固定剂较温和，适于组织的*保存。组织标本于该固定液中，4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。

5，细胞爬片具体步骤是什么

单位实验室做过，小编顺便推荐一下细胞爬片是从上海晶安生物公司买的，实验效果不错.细胞免疫荧光步骤：1.细胞爬片；首先是玻片的处理，普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块，先用洗衣粉洗干净，用水冲静烤干，然后泡酸过夜，捞酸后流水洗净，烤干，置于器皿中高压灭菌，然后再烤箱中大约8小时烤干备用。爬片可以在培养皿 六孔板或24孔板中都可，我选择在培养皿中爬。一为节约经费（培养皿可以重复利用）二来觉得培养皿口大，操作比较方便。培养皿消毒同上，消毒时记得消两把镊子具体操作是：用胰酶消化好细胞，充分吹打，使之成单细胞悬液（注意：这一点很重要，关系到将来爬出来片子的质量）取出消毒的培养皿，可以先加少量培养基（以使玻片与培养皿紧密接触），将玻片小心放入摆放其中，然后将单细胞悬液一滴一滴的滴到玻片上。最后盖上培养皿置于37度5％CO2的暖箱中培养，根据细胞生长状况，24小时或更长时间适时取出爬片。爬片置于37度PBS中洗三次，每次3到5秒钟，然后在4％多聚甲醛中固定15分钟，然后再用37度去离子水将甲醛冲干净，注意手法轻柔，要不然掉片很厉害。同时操作过程中注意玻片的正反面，要不然真的是前功尽弃。将做好的爬片置于滤纸上晾干，然后用中性树胶粘在载玻片上。注意一定要等中性树胶彻底干了之后才能做后续实验，要不然玻片会掉下来的，就又是前功尽弃了 做好的细胞爬片可以放在－20保存备用，具体能保存多长时间不太清楚，当然尽量早用。2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮)；3.PBS漂洗5min；4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理)；5.PBS漂洗2次，每次5min；6.1%BSA封闭30min；7.加入1%BSA稀释的一抗，于37℃杂交2h；8.PBS漂洗2次，每次5min；9.加入1%BSA稀释的二抗，于37℃杂交1h；10.PBS漂洗2次，每次5min；11.5ug/ml DAPI染色2min；12.抗淬灭封片剂封片。抗淬灭封片剂:2.5% DABCO (w/v)50mM Tris(pH8.0)90%甘油
先清洗细胞，尽量吸尽液体，加入4%多聚甲醛，室温固定10-15min。我一直都是这么做的，你要是觉得时间短也可以20min。

6，甲醛是干什么用的

甲醛为较高毒性的物质，在我国有毒化学品优先控制名单上甲醛高居第二位。甲醛已经被世界卫生组织确定为致癌和致畸形物质，是公认的变态反应源，也是潜在的强致突变物之一。研究表明，甲醛具有强烈的致癌和促癌作用。甲醛对人体健康的影响主要表现在嗅觉异常、刺激、过敏、肺功能异常、肝功能异常和免疫功能异常等方面。其浓度在每立方米空气中达到0．06-0．07mg/m3 时,儿童就会发生轻微气喘。当室内空气中甲醛含量为0.1mg/m3 时， 就有异味和不适感；达到0.5mg/m3 时，可刺激眼睛，引起流泪；达到0.6mg/m3 ，可引起咽喉不适或疼痛。浓度更高时，可引起恶心呕吐，咳嗽胸闷，气喘甚至肺水肿；达到30mg/m3 时，会立即致人死亡。 长期接触低剂量甲醛可引起慢性呼吸道疾病，引起鼻咽癌、结肠癌、脑瘤、月经紊乱、细胞核的基因突变，DNA单链内交连和DNA与蛋白质交连及抑制DNA损伤的修复、妊娠综合症、引起新生儿染色体异常、白血病，引起青少年记忆力和智力下降。在所有接触者中，儿童和孕妇对甲醛尤为敏感，危害也就更大。据相关资料统计显示：人类有70%的病症与室内环境有关，我国每年有12万人死于室内污染，90%以上的幼儿白血病患者都是住进新装修房一年内患病的。
4%的甲醛溶液实际上指的是10%甲醛溶液，因为甲醛溶液本身含量为39%，一般用水稀释配成10%的溶液用作组织固定用。习惯上叫10%甲醛溶液，实际上含甲醛量是4%。4%的多聚甲醛是用pbs溶解固体多聚甲醛配成。多聚甲醛是固体试剂，甲醛是液体试剂；二者配置方法也不一样，多聚甲醛需要在加热的条件下配置，时间很长，溶剂是pbs。甲醛可以直接用h2o稀释配置而得。
达到0.6mg/m3 时。其浓度在每立方米空气中达到0．06-0．07mg/，是公认的变态反应源；达到30mg/，引起鼻咽癌，我国每年有12万人死于室内污染、白血病、引起新生儿染色体异常。 长期接触低剂量甲醛可引起慢性呼吸道疾病、肝功能异常和免疫功能异常等方面，可引起恶心呕吐。当室内空气中甲醛含量为0：人类有70%的病症与室内环境有关，DNA单链内交连和DNA与蛋白质交连及抑制DNA损伤的修复、月经紊乱、细胞核的基因突变;m3 时， 就有异味和不适感、脑瘤，儿童和孕妇对甲醛尤为敏感，可引起咽喉不适或疼痛，会立即致人死亡。浓度更高时。在所有接触者中;m3 时。据相关资料统计显示;m3 时。研究表明，危害也就更大，引起流泪.1mg/，可刺激眼睛.5mg/；达到0、妊娠综合症，气喘甚至肺水肿、过敏，咳嗽胸闷，引起青少年记忆力和智力下降，甲醛具有强烈的致癌和促癌作用，也是潜在的强致突变物之一。甲醛已经被世界卫生组织确定为致癌和致畸形物质，在我国有毒化学品优先控制名单上甲醛高居第二位,儿童就会发生轻微气喘、肺功能异常、结肠癌、刺激甲醛为较高毒性的物质，90%以上的幼儿白血病患者都是住进新装修房一年内患病的。甲醛对人体健康的影响主要表现在嗅觉异常;m3

7，血细胞涂片可以选用的固定液可以有哪些

1、95%酒精： 　　是最常用的细胞学固定液，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋沉淀后，能溶于水，因此，经95%酒精固定的涂片，染色前没有必要经过水洗。此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色。固定时间根据标本的不同，时间也不尽相同，一般标本固定时间为15-30分钟，痰标本需要更长一些时间。经过95%酒精固定的标本，细胞核保存较好，结构清晰，颜色鲜艳。如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳，可以保护细胞免受空气干燥后的人工假象。2、乙醚酒精液（1：1）： 　　其效果与95%酒精相似，但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味，容易挥发，长期低浓度吸入，有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应。长期皮肤接触，可发生皮肤干燥、皲裂。所以现在已经逐渐被95%酒精所代替。3、甲醇： 　固定时间快，细胞收缩小，细胞核保存较好，结构清晰，染色鲜艳。常作为穿刺细胞涂片的固定液。对抗原保存较好，可作为细胞涂片免疫组化的固定液。缺点是具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害。甲醇的毒性与其代谢产物甲醛和甲酸的蓄积有关。以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不能合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩。近年研究表明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害，主要与甲酸含量相关。4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用。不能沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白。渗透性强，固定快，能使红细胞膨胀而破碎，常与其它液体配合使用。4、无水酒精： 　对糖原保存较好，容易使细胞收缩，其性能与95%酒精相似，很少单独使用，一般只用于糖原的固定。5、丙酮： 　为易挥发的无色液体，有刺激性气体。可使蛋白质沉淀，渗透性强，细胞收缩严重，对核的固定差。很少用于常规细胞学的固定。广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定，也有人用于抗原的保存，作为细胞涂片免疫组化的固定液。丙酮具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害。6、Carnoy 固定液配方：无水乙醇60ml，氯仿30ml，冰醋酸10ml。　　Carnoy液能固定胞浆和胞核，尤其适宜于染色体等。常用于糖原及尼氏体的固定，由于冰醋酸能溶解红细胞并可防止细胞由酒精引起的过渡收缩，对固定有血的标本和显示DNA、RNA效果很好。缺点是每次固定后固定液内有大量的红细胞碎片和细胞脱落，必须及时过滤，否则容易造成污染。其次，氯仿具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害。7、10%中性缓冲甲醛液：固定液配方1：40%甲醛10ml，0.01mol/L pH7.4的PBS90ml。固定液配方2：40%甲醛120ml，蒸馏水880ml，磷酸二氢钠（NaH2PO4?H2O）4g，磷酸氢二钠（Na2HPO4）13g。　　10%中性缓冲甲醛液对大多数抗原保存较好，是免疫组织化学最常用的固定液，组织穿透性好，组织收缩较小。但此液体不适合固定湿固定的涂片，可作为干固定涂片和细胞蜡块的固定液。甲醛也具有挥发性和毒性。大量吸入会出现呼吸道的严重刺激和水肿、眼刺痛、头痛，也可发生支气管哮喘。经常吸入少量甲醛，能引起慢性中毒，出现粘膜充血、皮肤刺激症、过敏性皮炎、指甲角化和脆弱、甲床指端疼痛等。全身症状有头痛、乏力、胃纳差、心悸、失眠、体重减轻以及植物神经紊乱等。
固定剂用于免疫组织化学的固定剂种类较多，性能各异，在固定半稳定性抗原时，尤其重视固定剂的选择，介绍如下。1．醛类固定剂　　双功能交联剂，其作用是使组织之间相互交联，保存抗原于原位，其特点是对组织穿透性强，收缩性小。有人认为它对igm、iga、j链、k链和λ链的标记效果良好，背景清晰，是常用的固定剂。（1）10%钙-福尔马林液（浓甲醛10ml，饱和碳酸钙90ml）。（2）10%中性缓冲福尔马林液（浓甲醋10ml，0.01mol/l ph7.4 pbs 90ml）。（3）4%多聚甲醛磷酸缓冲液ph7.4（多聚甲醛40g, 0.1mol/l pbs液ph7.4 500ml，两者混合加热至60℃，搅拌并滴加1n naoh至清晰为止，冷却后加pbs液至总量1000ml）。（4）戊二醛-甲醛液（戊二醛1ml，浓甲醛10ml，蒸馏水加至100ml）。戊二醛是二醛基化合物，交联结合力比甲醛大，bullock认为交联过强，可出现组织改变和空间遮蔽现象，影响组织的抗原性。但mcdonald等认为，该试剂用于pap法免疫酶标记效果仍满意。（5）甲醛升汞固定液（即b5固定液。浓甲醛10ml，氯化汞6g,醋酸钠1.25g ,蒸馏水90ml）。有人认为此固定液悬液是较理想的固定液，标记iga、igm、igg等抗原效果良好。也有人认为它减弱细胞的抗原性，上皮细胞可产生非特异性荧光，故不宜用于免疫荧光标记。氯化汞是一种强蛋白凝固剂，但对组织穿透性弱，且使组织收缩，故与甲醛混合使用。（6）醋酸-甲醛液（浓甲醛10ml，冰醋酸3ml，生理盐水加至100ml）。bullock等认为此液固定效果良好，组织可不经消化，胞浆iga、igg、igm、igd和k、λ、j链标记均呈阳性，且背景染色极淡。如标记igg用pap法第一抗体仅为甲醛升汞液的1/10。此液内醋酸既可防止组织收缩，又可暴露胞浆免疫球蛋白抗原决定簇。（7）bouins液。该固定液为组织学、病理学常用固定剂之一，对组织穿透力较强而收缩性较小，比单独醛类固定更适合免疫组化染色。kayhko认为用于标记b细胞的j链较好，但bullock则认为它可导致igg γ重链变性，故必需加大第一抗体的浓度。（8）zambonis液。该固定液可用于电镜免疫细胞化学，对超微结构的保存优于纯甲醛，也适用于光镜免疫细胞化学研究。采用2.5%多聚甲醛和30%饱和苦味酸，更可增加对组织穿透力和固定效果，以保存更多的组织抗原。固定时间6-18h。（9）plp液（过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液）。该固定剂适用于富含糖类的组织，对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。其机制是过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基，通过赖氨酸的双价氧基与醛基结合，从而与糖形成交联。组织抗原大多数是由蛋白质和糖两部分构成，抗原决定簇位于蛋白部分，故该固定液有选择性地使糖类固定，既稳定缺的，又不影响其在组织中的位置（固定剂7-9配制法见附录1）。

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